Маркери гепатитів В і С — це специфічні антигени і антитіла, які торік у сироватці крові є підтвердженням діагнозу. Антигени — це частинки цитоплазматичної мембрани збудника (поверхневий антиген) або частки оболонки нуклеокапсида (внутрішній антиген). Вірусний гепатит, незалежно від типу, інфікує гепатоцити. Імунна система здорової людини сприймає уражені клітини як генетично чужорідні, тому знищує їх за допомогою вироблення антитіл. Загибель клітин стає причиною розвитку запального процесу.
Аналіз крові на маркери
Для підтвердження діагнозу необхідний цілий ряд аналізів, мета яких — виявлення антигенів — частинок віріонів або антитіл, імуноглобулінів плазми крові. Дозволяють виявити маркери вірусних гепатитів В і С аналізи методами ПЛР і ІФА.
Аналіз крові на маркери вірусних гепатитів можна здавати не раніше ніж через 8 годин після останнього прийому їжі. Часто пацієнтів турбує питання, скільки чекати результати аналізів. На проведення ІФА необхідно від 1 до 10 днів. ПЛР може бути виконана за кілька годин.
Приводом для проведення аналізу на гепатит В і С є:
Підготовка до вакцинації або оцінка ефективності вакцини.
Маркери HBV
Клітини вірусу складаються з зовнішньої мембрани, цитоплазми і нуклеокапсида — ядра, укладеного в власну оболонку. Ядро містить ДНК збудника — носія його генетичної інформації і фермент ДНК-полімеразу, необхідний для реплікації віріонів.
Клітка збудника містить наступні маркери вірусного гепатиту цього типу:
HBsAg (Hepatitis B surface antigen). Цей комплекс протеїнів клітинної оболонки збудника — визначальний фактор для постановки діагнозу. Виявлення в сироватці крові антигена HBs є абсолютним підтвердженням наявності вірусу у пацієнта. Виявлення цієї речовини через 6 місяців після зараження свідчить про хронічну форму захворювання.
Здача аналізу на гепатит B має на меті підтвердження наявності збудника на підставі виявлення маркерів, визначення стадії захворювання, крім того, активності інфекційного агента.
Про що говорять маркери
HBsAg необхідний вірусу для формування власної оболонки. На початковому етапі захворювання він синтезується з надлишком, його кількість навіть перевищує потреби збудника. Цей вірусний антиген був відкритий першим, він є провідним для постановки діагнозу. Ця речовина можна виявити за 1- 10 тижні після зараження, за 2- 6 тижнів до появи перших клінічних ознак запалення печінки. Цей вірусний маркер дозволяє визначити форму захворювання: якщо HBs-антиген залишається в крові через 6 місяців після інфікування, це свідчить про хронічну форму. У разі елімінації збудника та клінічного одужання пацієнта антитіла до цього антигену (anti-HBs або HBsAb) виявляють вже після зникнення його самого.
Іноді при обстеженні на маркери гепатиту HBs-антиген не виявляється. Це може свідчити про те, що імунна система знищує уражені клітини швидше, ніж HBsAg встигає надходити в кров’яне русло. В цьому випадку діагноз грунтується на виявленні HBcorAb IgM. Відсутність HBs-антигену на тлі важкого гострого перебігу хвороби при підтвердженні діагнозу за допомогою присутності в крові IgM зазвичай спостерігається у 20% пацієнтів і нерідко закінчується летальним результатом.
Оскільки вірусний антиген HBcor не можна виявити в крові, маркерами його присутності є HBcor-антитіла — імуноглобуліни класу М і G.
IgM є ознакою гострої стадії захворювання, яка триває не більше 6 місяців. Цей імуноглобулін можна виявити вже з перших тижнів після зараження, потім він поступово зникає. У 20% інфікованих IgM виявляється протягом 2 років. При хронічній формі запалення печінки концентрація цього антитіла незначна.
IgG є ознакою контакту з інфекційним агентом, він присутній в сироватці крові все подальше життя людини, незалежно від форми захворювання.
HBeAg є ознакою реплікації віріонів і високого ступеня контагиозности носія. Якщо в черговому результаті аналізу на гепатит В виявлено зникнення цього антигену, при цьому реєструється поява антитіл до нього, це є ознакою ремісії.
Наявність в аналізі на гепатит В вірусного ДНК свідчить про гостру формі хвороби. На ранній стадії наявність цього маркера є основною ознакою реплікації HBV. Його виявляють за допомогою ПЛР (полімеразної ланцюгової реакції), суть якої полягає в багаторазовому подвоєнні ділянки ДНК збудника за допомогою спеціальних ферментів до отримання кількості матеріалу, достатнього для детекції.
Копіювання відбувається тільки певної ділянки геному. Така точність дозволяє виявити навіть одиничну молекулу ДНК в матеріалі і встановити присутність вірусу в доклінічних період. Точність реакції становить 98%. Метод застосуємо для виявлення генетичного матеріалу РНК-вірусів.
Розшифровка
Розшифровка аналізів полягає в інтерпретації результатів. Результат вважається негативним, якщо маркери в крові не виявлено. Виявлення HBsAg свідчить про наявність вірусу у пацієнта, а наявність HBs-антитіл і IgG є ознакою перенесеного захворювання або щеплення.
Маркери вірусного гепатиту HBeAg, ДНК-полімерази, власне ДНК вірусу і IgM — показник активного розмноження клітин збудника. Крім того, HBe-антитіла свідчать про високу концентрацію збудника, контагиозности носія інфекції, а також можливості перинатального зараження. Наявність HBe-антитіл є ознакою закінченою реплікації віріонів.
Зазвичай рекомендують здавати кров одночасно на три показника: HBsAg, Anti-HBs, Anti-Hbcor. Ці речовини виявляють за допомогою ІФА. Методом ПЛР підтверджують наявність ДНК вірусу, кількість збудника, його генотип.
Маркери HCV
Маркери вірусного гепатиту С — це антитіла до вірусу і його РНК. В першу чергу для підтвердження присутності збудника в організмі необхідно здати аналіз на anti-HCV — сумарні антитіла до вірусу гепатиту С . Імунологічні дослідження дозволяють виявити маркери збудника, якими є антитіла класів М і G. Вони виробляються у відповідь на присутність в крові у пацієнта структурних і неструктурних білкових частинок віріонів. IgM і G можна виявити протягом перших 14 днів хвороби і після клінічного одужання.
Виявлення сумарних імуноглобулінів може бути ознакою як гострого, так і хронічного перебігу хвороби. Для визначення більш точних термінів інфікування, крім того, форми захворювання необхідно здати кров на кожне з антитіл окремо. Трапляється, що імунологічні тести виявляють імуноглобуліни тільки через кілька місяців після прояву клінічної картини запалення печінки.
Розшифровка результату імунологічного аналізу:
Імуноглобуліни присутні в крові реконвалесцентів до 10 років, концентрація їх при цьому поступово знижується.
Оскільки імунологічні тести можуть дати псевдонегативну або хибнопозитивний результат, додатково виявляють такі маркери вірусного гепатиту С, як специфічні IgG до антигенів вірусу сore, NS1 NS2 NS3 NS4 NS5. Результат аналізу вважається позитивним, якщо виявлені антитіла до 2 або більше антигенів цієї групи.
Для визначення генотипу збудника і його кількості застосовують полімеразної ланцюгової реакції. Це дослідження дозволяє виявити РНК на ранніх етапах захворювання і навіть в інкубаційний період, коли серологічні маркери ще неможливо виявити. Для реплікації використовують стабільний ділянку генома вірусу. Крім того метод ПЛР дозволяє визначити кількість копій вірусної РНК в одиниці об’єму крові (копії /мл або копії /см3). Цей показник використовують для оцінки ефективності противірусної терапії. Крім того, ПЛР дозволяє визначити серовариантов збудника. ВООЗ рекомендує тричі проводити реакцію ПЛР для виявлення РНК HVC для остаточного підтвердження діагнозу.
Надчутливість реакції ПЛР може стати причиною ложноположительного результату, тому для постановки заключного діагнозу необхідний комплексний аналіз показників крові як серологічних, так і біохімічних, спостереження за зміною цих показників в динаміці, крім того, морфологічна оцінка стану ураженого органу.