Результати ПЛР: розшифровка і інтерпретація.

Результати ПЛР і особливості їх розшифровки цікавлять багатьох людей, чиїм діагнозом є підозра на ЗПСШ.
Як відзначають лікарі, метод має високу результативністю і мінімальним відсотком помилок. Тому часто використовується як контрольний в діагностиці інфекційних процесів.
В чому полягає суть ПЛР методики, хочуть знати хворі люди, і завдяки чому забезпечується висока ймовірність отримання вірних результатів. Як розшифровуються отримані підсумки, і чи є зв’язок між цим методом і іншими способами діагностики?
статті

Суть методу ПЛР

ПЛР-методика — дослідження, яке використовується досить широко в сучасному світі. Діагностика дозволяє поставити діагноз не тільки при інфекційних процесах, а й при генетичних патологіях, деяких онкологічних недугах. Спочатку ПЛР винаходилась не для застосування в медицині.
У галузь охорони здоров’я метод прийшов з галузі молекулярної біології, в якій активно використовувався після свого відкриття. Вчений, який створив ПЛР, отримав нобелівську премію.
Перш ніж розбиратися, як розшифровувати результати аналізів ПЛР, необхідно зрозуміти, в чому основна суть методики.
Насправді на словах все виглядає досить просто. У пацієнта береться біологічний матеріал. Потім він обробляється особливим чином за допомогою спеціальних хімічних реагентів.
Потім отриману суміш поміщають в особливу машину, яка проводить процес ампліфікації.
Тобто багаторазового множення певних фрагментів ДНК або РНК, що вдалося виявити за допомогою додавання реагентів.
Коли процес ампліфікації підійде до кінця, доктору залишається тільки ідентифікувати отримані результати, щоб поставити правильний діагноз.
Головне — проявити уважність на етапі ідентифікації. Але з огляду на, що сьогодні більшу частину роботи робить комп’ютер, все сильно спрощується.
ПЛР відрізняється високою ефективністю. Її широко застосовують для того, щоб визначати наявність в організмі прихованих інфекційних процесів, які не дають позитивних серологічних реакцій. Також приховані інфекції зазвичай не можна виявити за допомогою посіву або мікроскопії. Тому часто ПЛР — єдиний достовірний спосіб постановки діагнозу в цьому випадку.

Які матеріали можна використовувати для ПЛР

Часто вдалість дослідження залежить від того, як і який матеріал брався для виконання аналізу. Однак у випадку з полімеразної ланцюгової реакцією розшифровка результатів ПЛР досліджень мало залежить від біологічного матеріалу, який брався у пацієнта. Набагато більше значення має підготовка до обстеження за допомогою методу.
Як матеріал можуть служити:

• кров, що здається в відповідності зі стандартними рекомендаціями з вени на ліктьовому згині
• мокрота, що збирається під час відкашлювання
• наліт з ротової порожнини, що збирається доктором в ранковий час, поки пацієнт ще не снідав і не чистив зуби
• мазок з статевих органів, що дає хороші результати в тому випадку, якщо хворий не мочився протягом декількох годин, відмовлявся від сексуальних контактів кілька днів і дотримувався ряд інших рекомендацій
• дослідження сечі, при якому біоматеріал також переважно збирати з ранку, не проводячи напередодні гігієну статевих органів
• 
  біоптати органів або тканин, одержувані за допомогою спеціальних інструментів і ін.

Як відзначають лікарі, матеріалом для ПЛР може бути абсолютно будь-яка рідке середовище організму людини.
При виборі головне пам’ятати про те, що перевагу віддають тому середовищі, де з більшою часткою ймовірності буде присутній збудник. Наприклад, при статевих інфекціях доцільніше брати мазок з статевих органів або кров, ніж мазок з ротової порожнини.
Вирішувати питання про те, які матеріали використовуються для отримання результатів ПЛР в тому чи іншому випадку, краще всього з лікуючим лікарем на прийомі. Доктор зробить оптимальний вибір, виходячи з передбачуваного у пацієнта захворювання.

Що значить позитивний результат ПЛР

ПЛР — метод, який може похвалитися своєю високою специфічністю.
Припустимо, доктор поставив собі за мету виявити якийсь патогенний мікроорганізм в тілі пацієнта. І якщо той насправді присутній в тілі, він буде виявлений. При цьому сплутати його з яким-небудь іншим патогеном завдяки унікальним кодом ДНК буде неможливо.
Якщо ПЛР позитивний, значить, в організмі з ймовірністю майже в 100% знаходиться збудник, пошук якого проводився лікарем. Адже методика розрахована, на відміну від багатьох інших діагностичних методів, саме на пошук самих збудників, а не їх слідів.
Як відзначають лікарі, при цьому дослідженні ймовірність випадково прийняти один збудник за одною зводиться до нуля. Зате існує ймовірність отримання позитивних результатів після терапії.
Якщо в організмі залишатимуться уламки нуклеїнових кислот. Однозначно позитивної реакція найчастіше буває, якщо пацієнт скаржиться на якісь конкретні симптоми інфекційного процесу. Причому результат буде зберігатися навіть протягом декількох місяців після того, як збудник буде повністю переможений і видалений з організму.

Що значить негативний результат ПЛР

Якщо ПЛР результат негативний, значне число пацієнтів автоматично вважають, що вони здорові.
Це практично правильне рішення.
Адже якщо підсумки виявилися негативними, значить фрагменти патогенного мікроорганізму були визначено тест-системою. З цього випливає логічний висновок, що мікроорганізму в тілі немає.
Однак варто враховувати, що незважаючи на всю свою високу чутливість і специфічність, методика має певний поріг чутливості. Якщо концентрація збудника на момент обстеження не переходить межу цього порога, результат буде розцінюватися, як негативні. Хоча насправді виявиться помилковим до пори до часу.
Доктора акцентують особливу увагу на те, що негативний результат не завжди означає відсутність патології. Щоб на 100% бути впевненим у своєму здоров’ї, пройти дослідження повторно рекомендується через кілька тижнів, а часом і місяців.

Хто з лікарів виконує розшифровку результатів ПЛР

Часто серед пацієнтів можна почути запитання про те, який лікар буде проводити розшифровку ПЛР дослідження.
В першу чергу необхідно запам’ятати, що довіряти результати варто того ж медичного працівника, що спочатку давав напрямок на дослідження.
Пов’язана ця рекомендація з тим, що в цьому випадку доктор буде уявляти собі, що він очікує побачити в аналізах. Чи зможе грамотно інтерпретувати результати, співвідносячи їх з клінічною картиною.
Отримати напрямок найбільш часто можна від уролога, гінеколога або венеролога. Відповідно, після отримання результатів відносити бланк з результатами варто комусь із них. Важливо пам’ятати, що ПЛР — досить дорогий метод діагностики. Його не прийнято використовувати просто так, без спеціальних показань до обстеження.
Серед них:

• поява специфічних для ЗПСШ симптомів
• обстеження перед плануванням вагітності або процедурою штучного запліднення
• пошук причин безпліддя і інші свідчення

Коли показники ПЛР стають позитивними після зараження

Часто пацієнти задають на прийомі у медичного працівника питання про те, коли результати ПЛР крові і мазків стають позитивними після зараження. Все залежить від того, наскільки швидко конкретна інфекція зможе, розмножуючись, пройти порогову для тесту концентрацію в матеріалі.
Перевагою ПЛР є те, що поріг чутливості у тесту досить низький. Це означає, що виявити ознаки зараження можна навіть в тому випадку, якщо кількість збудника в біологічному матеріалі буде мінімальним.
Подібна особливість дає можливість постановки діагнозу навіть в період інкубації, коли симптоми ще повністю відсутні.
Однак осічка можлива і при застосуванні ПЛР методики. Це відбувається, наприклад, якщо порогова концентрація все ж не встигла досягти визначених тестом значень. У цьому випадку велика ймовірність отримання далеких від правди результатів.

Вид бланка аналізів на ПЛР

Питання про те, як виглядає бланк результатів аналізів ПЛР, саме на часі.
Як відзначають лікарі, нічого складного в зовнішньому вигляді паперу немає. Найчастіше на документі можна знайти назву шуканого збудника. А навпроти нього позначку В «обнаруженВ» або В «Не обнаруженВ».
У першому випадку пацієнту рекомендується потурбуватися власним здоров’ям. Так як аналіз розцінюється як позитивний, а людина, як заражений. Отже, йому потрібна терапія.
У другому випадку найчастіше стан пацієнта оцінюють, як здорове, хоча можуть бути і виключення. Важливо пам’ятати, що кількість збудників, зазначених на бланку, залежить багато в чому від того, яке конкретно вид аналізу застосовувався.
Якщо проводився пошук тільки одного патогенного мікроорганізму, в результаті буде фігурувати тільки його назву з відповідною позначкою. Якщо ПЛР проводилося відразу на кілька інфекцій, що теж можливо, в бланку буде список патологій з позначками.
Сьогодні в лабораторіях при комплексному аналізі на групу інфекцій не прийнято видавати на кожен патогенний мікроорганізм окремий бланк. Їх все вказують на одному аркуші.

Імовірність помилкових результатів при ПЛР

Часто пацієнти цікавляться питанням про те, чи можливе отримання помилкових результатів обстеження при використанні методики. На жаль, як зазначають лікарі, помилки хоч і рідко, але трапляються.
Існує, наприклад, ймовірність отримати хибнопозитивні результати ПЛР відразу після лікування. Пояснюється це дуже просто.
Терапія вже закінчена, збудник видалений з організму і не може заражати нові тканини. Однак залишки ДНК або РНК ще можуть циркулювати в крові або іншому діагностичному матеріалі. У цьому випадку тест-система буде вловлювати їх і сприймати за повноцінну патологію, видаючи псевдопозитивний підсумок.
Саме тому рекомендується після терапії здавати дослідження кілька разів з різними проміжками часу. Тільки в цьому випадку підсумки будуть досить об’єктивними.
Помилково негативні результати аналізів ПЛР після прийому антибіотиків також можливі. Відбувається це в тому випадку, якщо пацієнт, невірно використовуючи препарати антибактеріальної ряду, змастив симптоми хвороби.
Чи не дозволив мікроорганізму активно розмножуватися в тілі, але при цьому і не довів його знищення до кінця. У цьому випадку кількість збудників може впасти нижче порогової концентрації чутливості. Це і дасть невірні результати тестування.

Зв’язок ПЛР з іншими методиками

За допомогою методу ПЛР доктора нерідко підтверджують або, навпаки, спростовують результати інших методів обстеження, які використовуються для діагностики ІПСШ.
Наприклад, з цією метою може використовуватися ІФА.
Буває так, що ПЛР негативний, а ІФА позитивний. Тоді хворий виявляється в замішанні щодо свого стану.
Доктора рекомендують не губитися, а спочатку провести обидва тести повторно. Якщо ІФА залишиться позитивним, а ПЛР негативним, з великою ймовірністю захворювання в організмі пацієнта відсутня.
Адже імуноферментний аналіз спрямований на реакцію антиген-антитіло. І часом може приймати подібні за структурою антигени інших збудників за шуканий, видаючи хибнопозитивні результати.
Імовірність того, що ІФА дало вірний результаті на другий раз, а ПЛР, навпаки, видало помилку, наприклад, через низький титру збудника, зведена до мінімуму. Це швидше казуїстика, ніж реальна клінічна практика.
Результати ПЛР діагностики мають високу цінність в діагностиці великої кількості різних патологій. В першу чергу методика є незамінною при підозрі на різні ЗПСШ.
Якщо вам потрібно здати отримати коментарі за результатами ПЛР, звертайтеся до автора цієї статті — венерологув Києві з багаторічним досвідом роботи.