Особлива увага в даний час приділяється діагностуванню ВІЛ (вірусу імунодефіциту) у людини. Виявлення хвороби на ранній стадії допоможе раніше розпочати лікувальний курс і це суттєво позначиться на збільшенні терміну життя хворого.
Після того, як буде зданий аналіз на ВІЛ розшифровка результатів, як правило, буває позитивною, або негативною. При цьому існує первинна діагностика і вторинна. При первинній — людини перевіряють за допомогою ІФА. Якщо це необхідно, робиться повторний аналіз крові на ВІЛ . Що значить позитивний і негативний результат? Як робиться розшифровка аналізу на ВІЛ? Чому у людини, яка не є наркоманом і алкоголіком, має постійного статевого партнера, розшифровка аналізу на вірус імунодефіциту дає позитивний, але сумнівний результат?
Про ВІЛ
Збудники захворювання бувають 1-ого та 2-ої типу. Тривалий проміжок часу їх присутність у людини проходить непоміченим, далі уражається в першу чергу імунітет, потім інші системи людини.
При основному методі лабораторного діагностування вірусу імунодефіциту виявляються антитіла до ВІЛ. Імуноферментний аналіз (ІФА) лежить в основі методу, він чутливий (995% і вище) і специфічний (998% і вище). Крім цього, при діагностуванні ВІЛ за допомогою ІФА визначають антиген р24.
Кожна тест-система має різні показники, в зв’язку з цим ними відбувається визначення різних білкових структур вірусних оболонок. Збудники ВІЛ бувають двох підтипів: 1-ого та 2-ого або ВІЛ-1 і ВІЛ-2. Вірусні частинки виглядають як сферична форма, що має зовнішню фосфоліпідну оболонку. Для 1-ого підтипу вона має наступну молекулярну масу: gp120 gp41 gp160. 2-ий підтип містить gp105 gp36 gp140. Для внутрішньої оболонки вірусу молекулярна маса так само відома. Для 1-ого підтипу це — p55 p17 p24. Для 2-ої — p16 p25 p55.
Взагалі результат ІФА може бути:
- негативний;
- псевдопозитивний;
- псевдонегативну;
- сумнівний або невизначений.
Методами діагностування виявляються антигени, антитіла.
Про нормальному результаті
Норма — що це означає? Коли аналіз на ВІЛ негативний, це вважається нормою.
1. Останнє покоління тест-систем ІФА дозволяють визначити наявність антитіл до ВІЛ і білкових частинок. Якщо аналіз в нормі, то в крові не знаходять антитіл і білкових частинок збудника. Але точно сказати, що людина здорова на основі цього можна, якщо до здачі його був відсутній ризик зараження 3 місяці. В іншому випадку ще раз через якийсь час треба повторити здачу аналізів.
Бували випадки, що ВІЛ виявляли тільки через 6 місяців. Тому, якщо результат негативний, а був контакт з ВІЛ-інфікованим хворим, для достовірності треба повторити здачу аналізів через три, чотири і шість місяців. Буває, що ІФА дав негативний результат, а у людини явно є підозра на присутність ознак ВІЛ, то рекомендується здати аналіз ще раз. Помилковий результат можливий через ранніх строків проведення аналізу або через людський фактор.
2. Якщо результат негативний отриманий при імуноблоті, то в даний час це самий достовірний аналіз.
Якщо у людини присутній вірус імунодефіциту, а результат негативний, то швидше за все це лікарська помилка, яка може виникнути на будь-якому етапі перевірки. Якщо при повторі імуноблоту через три і шість місяців результат негативний, то турбуватися нема про що, це говорить про норму. І тільки після негативної відповіді імуноблоту буде видана довідка, що ВІЛ аналіз негативний.
3. ПЛР дослідження у дорослих при діагностуванні вірусу імунодефіциту використовується вкрай рідко, а для щойно народжених дітей використовується саме цей метод.
4. Згідно із соціологічними дослідженнями, багато хто користується експрес-тестом на ВІЛ. При вигляді від’ємної смужки люди заспокоюються і відмовляються йти в медичний заклад, навіть при наявності всіх ознак ВІЛ-інфікування. Але треба знати, що точність експрес-тесту складає вісімдесят п’ять відсотків. Крім цього, в домашніх умовах можна невірно його провести, або будуть порушені умови його зберігання. Виникає ще більша ймовірність, що результат є помилковим. Навіть прийом за 8 годин до тестування мінеральної лужної води вплине на результат тесту. Тому про те, що вірус імунодефіциту відсутня у людини на підставі експрес-тесту, навіть якщо він негативний, далеко не завжди є вірним твердженням.
Розшифровка аналізу
Після того, як було проведено тестування у людей часто виникає питання, як розшифрувати результат досліджень, що робити, якщо отримано позитивний результат на ВІЛ.
1. Якщо ІФА показав наявність всіх або майже всіх антитіл до антигенів згідно даної тест-системи, це означає позитивний аналіз на ВІЛ. Якщо відповідь після проведення другого серологічного імуноферментного аналізу позитивний, то необхідно провести імуноблот. Розшифровка результатів його буде більш вірною. Якщо імуноферментний аналіз дав позитивний результат, наступний аналіз імуноблоту так само показав наявність ВІЛ, то ставиться заключний результат. Коли розшифровуються аналізи, то треба знати, що позитивний тест на ВІЛ визначається:
- від 60% до 65% через 28 днів після зараження;
- в 80% — через 42 дня;
- в 90% — через 56 днів;
- в 95% — через 84 дня.
Якщо отримана відповідь на ВІЛ позитивний, то це буде означати, що виявлені антитіла до вірусу. Щоб уникнути псевдопозитивний відповідь, треба здати повторно аналізи, бажано два рази. Якщо антитіла до імунодефіциту виявлено при здачі двох аналізів з двох або при здачі 3-х аналізів в 2-х з них, то вважається, що результат позитивний.
Антиген р 24 можна виявити в крові вже через 14 днів з дня зараження. За допомогою методу імуноферментного аналізу цей антиген виявляється від 14 до 56 днів. Після 60 днів його в крові вже немає. Тільки коли в організмі формується СНІД, відбувається повторно зростання цього білка р24 в крові. Тому тест-системи імуноферментного аналізу використовуються, щоб виявити ВІЛ в перші дні зараження або для того, щоб визначити, як протікає захворювання і контролювати процес лікування. Висока аналітична чутливість імуноферментного аналізу виявляє антиген р24 в біологічному матеріалі при ВІЛ першого підтипу в концентрації від 5 до 10 пкг /мл, при ВІЛ другого підтипу від 05 нг /мл і менше.
2. Під сумнівним результатом імуноферментного аналізу мається на увазі, що при діагностуванні десь помилилися, як правило, щось переплутали медичні працівники, або у людини є ознаки інфікування, а результат негативний, що викликає підозру, людини направляють на повторну здачу аналізу.
3. Під хибнопозитивним результатом розуміється результат, коли здача аналізів крові була зроблена при наступних станах хворого:
- вагітність;
- якщо у людини порушений гормональний фон;
- при тривалій імунодепресії.
Як розшифрувати аналіз в цьому випадку? Хибнопозитивний результат ставиться, якщо виявляється хоча б один білок.
Через те, що антиген р24 дуже залежить від індивідуальних варіацій, то, використовуючи цей метод, в перший період зараження виявляється від 20% до 30% хворих.
Про показники після дослідження методом полімеразної ланцюгової реакції
Використовуючи цей метод РНК ВІЛ і ДНК виявляється майже відразу після зараження. Але остаточного діагнозу не ставиться, потрібне обов’язкове підтвердження іншими методами. У «Допоможіть розшифрувати результат ПЦР.В» — досить часто можна почути таке прохання. Що пишеться в цьому випадку, якщо виявляється вірус імунодефіциту? При відповіді на результат аналізу, зробленого за допомогою ПЛР вказується кількість копій РНК в мілілітрі крові. У таблиці, наведеній нижче, показаний результат в залежності від кількісних характеристик в крові.
Кількісний показник
(К-ть копій)
Менше 20
Від 20 до 10 6
Більше 10 6
Для постановки діагнозу концентрації РНК недостатньо (неточний)
Достовірний
Вірусне навантаження велика
Використовувати вищенаведену таблицю добре, коли робиться обстеження на СНІД, так як по ній легко визначається стадія хвороби.
Ці таблиці з урахуванням різних тест-систем є в лабораторних кабінетах для кожного методу імуноферментного аналізу і иммуноблоттинга.
Часто просять: В «Розшифруйте відповідь після дослідження методом полімеразної ланцюгової реакції по показнику СД4.В» Нормальним вважається кількість клітин CD4 від 600 до 1900 клітин на мілілітр біологічного матеріалу. Це відповідає ВІЛ-негативного статусу. Але треба знати, що ці показники навіть у здорових людей бувають не в цьому діапазоні.
У сучасному світі вже багато лабораторій мають хороше обладнання, за допомогою якого можна повністю дослідити організм на вміст у ньому ВІЛ-інфекції.