Імуноферментний аналіз крові є поширеним методом виявлення різних патологій. Результат аналізу крові, розшифровка ІФА якого була інтерпретована лікарем лабораторної діагностики, є достовірним в більшості випадків.
Що таке ІФА
ІФА — сучасний діагностичний метод, який застосовується для діагностики інфекцій, гормональних і імунних порушень, онкологічних захворювань в лабораторних умовах. Метод дозволяє виявити антитіла до інфекції вже на ранніх термінах захворювання. Даний метод відноситься до непрямих діагностичних методів, так як він виявляє імунну відповідь організму. Серед переваг ІФА в порівнянні з іншими методами діагностики можна виділити високий рівень технологічності, що зменшує ймовірність помилок. Метод є високочутливим і застосовується для діагностики захворювань як у дітей, так і у дорослих. Існує велике кількість різних модифікацій ІФА.
Метод ІФА грунтується на специфічності иммунохимических реакцій, а також фізико-хімічних закономірності реакцій комплексів антиген-антитіло. Реакції виробляються за участю специфічних ферментів, які є мітками для визначення антитіл. В результаті імуннохімічної реакції строго певні антитіла зв’язуються з відповідними антигенами. Дослідження крові методом імуноферментного аналізу майже виключає можливість отримання ложноположительного результату. Про позитивному або негативному результаті фахівці лабораторної діагностики судять виходячи з того, чи відбулося фарбування розчину в ході ферментативної індикації комплексу антиген-антитіло. Якщо розчин убрався, то сталося взаємодія антигену з антитілом, результат ІФА позитивний.
Які захворювання можна виявити методом ІФА
Дослідження методом імуноферментного аналізу дозволяє:
- виявити ряд інфекційних захворювань;
- діагностувати аутоімунні захворювання;
- виявити наявність онкології;
- визначити гормональні порушення;
- провести інші дослідження.
Аналіз крові методом ІФА дозволяє визначити наявність наступних інфекцій:
- вірусні гепатити;
- ВІЛ;
- цитомегаловірус;
- вірус Епштейн-Барра;
- герпетичні інфекції;
- краснуха;
- бореліоз;
- паразитарні інфекції;
- ЗПСШ;
- інші інфекції.
Метод застосовується для виявлення антигенів збудників ряду інфекцій, а також для виявлення антитіл різних класів. Велику популярність метод ІФА отримав для виявлення сифілісу, ВІЛ, вірусних гепатитів. Визначати наявність та рівень антитіл в сироватці крові з метою первинної діагностики ІПСШ не рекомендується. В даному випадку наявність антитіл в крові може бути лише ознакою того, що організм пацієнта контактував зі збудником інфекції в минулому.
Діагностика різних аутоімунних захворювань методом ІФА проводиться за допомогою дослідження:
- антинуклеарних тіл;
- антитіл до двухспіральной ДНК;
- антитіл до розчинним нуклеарним антигенів (ENA скрін);
- антикардіоліпінові антитіл;
- IgG до цітруліновому пептиду;
- ревматоїдного фактора;
- С-реактивного білка;
- аутоантитіл до цитоплазматическим антигенів нейтрофілів (ANCA скрін).
Специфічні імунні комплекси характерні для певних аутоімунних захворювань. Наприклад, антитіла двуспиральной ДНК є характерними для такого захворювання, як системний червоний вовчак.
ПСА свідчить про наявність аденоми простати і раку простати. СА-125 — це онкомаркер злоякісної пухлини яєчника. Значення підвищується і при ракових пухлинах матки, молочних залоз, ендометрія.
Підготовка до аналізу
Щоб забезпечити максимальну точність результатів, потрібно дотримуватися певних правил підготовки до дослідження. Аналіз для лабораторної діагностики методом ІФА, як правило, здається вранці з ліктьової вени. Здавати кров необхідно строго натщесерце. Крім цього простого припису, слід виконувати такі рекомендації з підготовки:
- за 24 години до дослідження необхідно виключити прийом алкоголю і куріння;
- уникати важких фізичних навантажень;
- перебувати в спокійному стані;
- уникати нервового напруження;
- здавати кров на ІФА не раніше, ніж через 10 днів після відміни ліків;
- попередити лікаря про прийом необхідних ліків.
Крім того, за кілька днів до здачі аналізу рекомендується дотримуватися дієти. При цьому з раціону виключити жирні продукти, смажену їжу. Перед аналізом на вірусні гепатити з раціону виключити не тільки жирне і смажене, а й цитрусові, а також помаранчеві овочі.
Слід зазначити, що на результати певного спектру гормональних досліджень впливає такий фактор, як фаза менструального циклу. Необхідність здавати аналіз в ту чи іншу фазу менструального циклу слід заздалегідь обговорити з лікарем. В іншому випадку можна отримати несподівані показники. Так, наприклад, нормальний рівень лютеїнізуючого статевого гормону у жінок варіюється в залежності від дня циклу:
- 1-12 день — 2-14 мед /л;
- 12-14 день — 24-150 мед /л;
- з 15 дня до початку нового циклу — 2-17 мед /л.
Розшифровка результатів ІФА
Аналіз дозволяє встановити наявність в організмі антитіл різних класів. Існують антитіла 3 класів:
- IgM;
- IgA;
- IgG.
Вироблення цих антитіл відбувається на різних стадіях захворювання. Найпершими після зараження в організмі починають вироблятися антитіла IgM. Їх наявність є показником хвороби в будь-якому випадку. В організмі здорової людини цей клас антитіл відсутня.
Імуноглобуліни класу G, присутні в крові, говорять про те, що людина або вже переніс захворювання, або є носієм інфекції. Ці антитіла починають вироблятися після антитіл класу М, при більшості захворювань на 3-4 тиждень після зараження. Їх присутність в організмі можливо протягом декількох років. А при деяких хворобах (наприклад, сифіліс) IgG присутні в крові довічно.
Якщо в організмі присутні IgA, необхідно якомога інтенсивніше боротися з інфекцією. Антитіла цього класу з’являються лише в разі хронічного інфекційного захворювання. Зникнення IgA говорить про знищення інфекції.
Якщо аналіз ІФА проводиться в дитячому віці до 15 років, повинна враховуватися наступна особливість: кров дитини містить IgG матері до різних інфекцій. Це зовсім не означає, що дитина хвора. В такому випадку це скоріше норма. Наявність IgM є свідченням внутрішньоутробної інфекції або інфекції, придбаної вже після народження. IgM матері не можуть проникнути в організм дитини через плаценту.
У таблиці представлені можливі комбінації наявності або відсутності в організмі антитіл 3 класів і їх інтерпретації.
Таблиця 1
IgM
IgG
IgA
Розшифровка
—
—
—
Імунітет до інфекції відсутній
—
+
—
Є поствакцинальний або постінфекційний імунітет
+
— /+
— /+
Гостра інфекція
+
+
+
Загострення хронічної інфекції
—
+/-
+/-
Наявність хронічної інфекції
При розшифровці аналізів (+) свідчить про позитивний результат, а (-) говорить про зворотне, тобто про негативний. Результат, який показує наявність або відсутність якої-небудь речовини в організмі, називається якісним. Він може бути доповнений кількісним. Кількісний результат відображає кількісний вміст різних речовин в організмі.
Варто відзначити, що тест-системи мають власні, визначені виробником, референтні значення, які характеризують показники. Перевищення референтних значень, як правило, означають наявність тих чи інших патологій в організмі досліджуваного.
Після отримання результатів ІФА розшифровку отриманих значень повинен виробляти лікуючий лікар. Тільки він зможе зробити правильну оцінку отриманих результатів і визначити стадію захворювання.