Гепатит С — запалення клітин печінки, що виникає внаслідок інфікування вірусом HCV (гепатиту С) за допомогою контакту з кров’ю зараженої людини. Генетичний код флавивирусов HCV несе молекула РНК (рібонукленіновой кислоти), що міститься в структурі вірусу. Це небезпечне для життя пацієнта явище відрізняє скритність на початковій стадії патології. Часовий інтервал між інфікуванням і появою симптомів (реагування імунної системи) може становити від одного місяця до півроку. Як правило, хвороба приймає хронічну форму і важко піддається лікуванню.
Сучасна медицина дозволяє діагностувати патологію при незначному ураженні печінки. До найпоширеніших і ефективних методів діагностики відноситься аналіз ПЦР. Розглянемо в даній статті, що це таке і які його різновиди існують.
Що являє собою дослідження
Аналіз ПЛР на гепатит С — обстеження в умовах лабораторії, що виявляє флавірус — генетичний матеріал вірусу рібонукленіновой кислоти (РНК). Воно визначає кількість молекул РНК в крові, якість біологічного матеріалу, генетичний тип флавіруса HCV. 
Метод ПЛР при гепатиті С дозволяє виявити мінімальну кількість флавіруса ще до формування антитіл, як правило, незабаром після інфікування.
Дослідження проводиться наступним чином: натщесерце пацієнт здає кров з вени, яка потім тестується різними методами:
- Real-Time PCR проводиться закритим автоматизованим способом і має нижній ліміт виявлення вірусу РНК, що дорівнює 15 МО /мл;
- COBAS AMPLICOR з сенситивністю 50-100 МО /мл.
Чим вище поріг чутливості у діагностичної методики, тим більше шансів виявити саме мінімальний вміст вірусу в досліджуваному біологічному матеріалі.
Які різновиди аналізу використовують
Аналіз, успішно застосовується вже кілька десятків років називається ПЛР гепатит при цьому виявляється досить просто і швидко. У медицині розрізняють дві методики проведення реакції, принципово відрізняються один від одного:
- якісний метод виявляє наявність в біологічному матеріалі генетичного джерела певного вірусу;
- кількісний аналіз вимірює число генетичної матерії, що дозволяє визначити стадію патології або оцінити ефективність проведеного терапевтичного курсу;
- генотипування визначає тип вірусу, присутнього в організмі.
В цілому аналіз крові допомагає виявити характер вирусемии і генетичний тип збудника. Як правило, дослідження проводиться 1 раз в залежності від ступеня чутливості діагностичної системи. При необхідності проводять повторне тестування, використовуючи ультрачутлива реагент.
Якісний ПЛР
Що таке якісний ПЛР РНК на гепатит С? Суть реакції полягає в присутності послідовності РНК гепатиту, причому виконання реакції можливо лише в разі присутності вірусних білків схожою етимології в ІФА. У процесі порівняння виявляється навантаження і можливу поразку області печінки.
Слід зазначити, що після отримання результатів дослідження ПЛР і ІФА, пацієнту потрібно відповідне лікування, незалежно від того, яким виявився підсумковий імуноферментний результат. Позитивний свідчить про інфікування, а ПЛР негативний — про зниженій кількості вірусних частинок щодо рівня чутливості.
Існує кілька умов, що впливає на отримання негативного показника ПЛР і ІФА:
- відсутність відповідних умов забору матеріалу;
- в отриманому аналізі присутні забруднення;
- в разі раннього введення пацієнту ін’єкцій гепарину.
З боку хворого не вимагається дотримання певних правил по забору крові на ПЛР аналіз, в даному випадку якість цього аналізу залежить від медичного працівника, який проводить процедуру. Можливість встановити присутність захворювання (особливо в гострій формі) з’являється вже через кілька тижнів після інфікування.
Кількісний аналіз
Кількісний тест рекомендується проводити для виявлення вірусного навантаження безпосередньо перед формуванням подальшої терапії і реакцією організму. Процес забору крові проводиться аналогічним чином, що при якісному ПЛР і ІФА, єдиною умовою є відсутність можливості куріння пацієнта перед процедурою.
Що стосується характеристики отриманих в результаті вивчення даних, то підвищене навантаження характеризується показниками від 800000 МО /мл, низький — 400000 МО /мл. Про присутність вірусу в організмі пацієнта говорить ПЛР на гепатит не негативний якісний тест.
Подібного роду дослідження дає можливість визначити, наскільки пацієнт небезпечний для оточуючих його людей. Так, наприклад, виявлення високого рівня говорить про підвищену заразність пацієнта. До того ж результати аналізу допомагають сформувати подальший найбільш ефективне лікування і визначити, на скільки наявна терапія вважається ефективною.
Процес проведення процедури взяття аналізу залежить від певного дня перебігу захворювання. Перше визначення проводиться в першу добу після надходження пацієнта в стаціонар, далі процедура повторюється на 412 і 24 тижні після того, як було розпочато прийом лікарських засобів.
Таким чином, кількісний аналіз показує, яке лікування є найбільш ефективним, тривалість наявної терапії і небезпека пацієнта по відношенню до інших людей.
Генотипування
При дослідженні матеріалу аналізу важливо визначити точність того генотипу вірусу, який має місце бути. В даний час існує 11 різновидів вірусу гепатиту С, які в свою чергу включають в себе певні підвиди.
Генотип дає можливість визначити і показати стан печінки. Нерідкі випадки, коли в результатах записується В «Не тіпіруетсяВ», що означає, що вірус, що знаходиться в крові пацієнта не визначається даної тестовою системою. Подібне може бути виявлено в разі, якщо певний генотип не відповідає даній зоні. У подібній ситуації паркан аналізу здійснюється повторно, при цьому для дослідження матеріалу використовується більш чутлива система.
Ультрачутлива метод
Ультрачутлива метод необхідний в певних випадках, коли діагностика гепатиту не може здійснюватися за допомогою інших методів, при цьому, коли здавати аналіз визначається лікуючим лікарем:
- при підозрі присутності вірусу гепатиту С у хворих, що мають приховану різновид захворювання;
- присутність антитіл щодо вірусу гепатит С, не підтверджений ПЛР-діагностикою;
- з метою визначення якості ефективності обраної методики лікування, і підтвердження факту усунення захворювання.
Чутливість даного методу значно вищі за ті, які зазвичай застосовуються, однак і цей метод не виключає отримання помилкових результатів, причому як позитивних, так і негативних. У подібній ситуації важливо контролювати якість проведення процедури і можливість забруднення самого матеріалу.
Розшифровка аналізу ПЛР
Розшифровка аналізу проводиться на основі представлених матеріалів, при цьому в результати лабораторних досліджень включаються певні дані, описані вище.
Розшифровка може включати в себе виявлення в аналізі позитивний ПЛР полімеразної ланцюгової реакції і від’ємного значення ІФА значить, що у пацієнта в крові відсутні ознаки гепатиту С, проте в минулому він перенесення гостру форму даного захворювання. Як правило, при діагностиці фахівці вдаються до використання саме показників тестів ПЛР.
Підводячи підсумок всьому вищесказаному, можна зробити висновок про те, що при проведенні аналізу важливо дотримуватися всіх правил і рекомендації, щоб отримані результати були максимально точними, а на основі отриманих даних можна було визначити ефективність використовується терапії і подальший шанс на повне одужання.
Загрузка...
